关于乙型肝炎病毒
1963年Blumberq在两名多次接受输血治疗的病人血清中 ， 发现一种异常的抗体 ， 它能与一名澳大利亚土著人的血清起沉淀反应 。直到1967年才明确这种抗原与乙型肝炎（简称乙肝）有关 ， 1970年在电子显微镜下观察到HBV的形态 ， 1986年将其列入嗜肝DNA病毒科 。乙型肝炎病毒（HBV）是一种DNA病毒 ， 属嗜肝DNA病毒科 ， 是直径42nm的球形颗粒 。又名Dane颗粒 ， 有外壳和核心两部分 。外壳厚7～8nm ， 有表面抗原（HBsAg） ， 核心直径27nm ， 含有部分双链或部分单链的环状DNA、DNA聚合酶、核心抗原及e抗原 。HBV-DNA的基因组约含3200个碱基对 。长链的长度固定 ， 有一缺口 ， 此处为DAN聚合酶；短链的长度不定 。当HBV复制时 ， 内源性DNA聚合酶修补短链 ， 使之成为完整的双链结构 ， 然后进行转录 。HBV-DNA的长链有4个开放性读框 ， 即S区、C区、P区和X区 。S区包括前S1、前S2和S区基因 ， 编码前S1、前S2和S三种外壳蛋白；C区包括前C区 ， C区基因编码HBcAg蛋白 ， 前C区编码一个信号肽 ， 在组装和分泌病毒颗粒以及在HBeAg的分泌中起重要作用；P基因编码DNA聚合酶；X基因的产物是X蛋白 ， 其功能尚不清楚 。HBV-DNA的短链不含开放读框 ， 因此不能编码蛋白 。1.乙型肝炎患者血清在显微镜的观察下可查见3种颗粒：（1）直径22nm的小球形颗粒 。（2）管状颗粒 ， 长100～700nm ， 宽约22nm 。（3）直径为42nm的大球形颗粒 。小球形颗粒及管状颗粒均为过剩的病毒外壳 ， 含表面抗原 ， 大球形颗粒即病毒颗粒 ， 有实心与空心两种 ， 空心颗粒缺乏核酸 。HBV在体外抵抗力很强 ， 紫外线照射 ， 加热60℃4小时及一般浓度的化学消毒剂（如苯酚 ， 硫柳汞等）均不能使之灭活 ， 在干燥或冰冻环境下能生存数月到数年 ， 加热60℃持续10小时 ， 煮沸（100℃）20分钟 ， 高压蒸汽122℃10分钟或过氧乙酸（0.5%）7.5分钟以上则可以灭活 。黑猩猩及恒河猴是对HBV易感的实验动物 。HBV的组织培养尚未成功 。2.HBV的抗原复杂 ， 其外壳中有表面抗原 ， 核心成分中有核心抗原和e抗原 ， 感染后可引起机体的免疫反应 ， 产生相应的抗体 。（1）乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和表面抗体（抗-HBs）：HBsAg存在于病毒颗粒的外壳以及小球形颗粒和管状颗粒 。于感染后2～12周 ， 谷丙转氨酶（ALT）升高前即可由血内测到 ， 一般持续4～12周 ， 至恢复期消失 ， 但感染持续者可长期存在 。HBsAg无感染性而有抗原性 ， 能刺激机体产生抗-HBs 。在HB-sAg自血中消失后不久或数星期或数月可自血中测到抗-HBs ， 抗-HBs出现后其滴度逐渐上升 ， 并可持续存在多年 。抗-HBs对同型感染具有保护作用 。近期感染者所产生的抗-HBs属IgM ， 而长期存在血中的为抗-HBsIgG 。（2）乙型肝炎前S抗原及前S抗体：前S1及前S2蛋白具有与HBsAg不同的抗原性 。完整的HBV颗粒含有S1蛋白及前S2蛋白 ， 而缺陷病毒颗粒则无前S2蛋白 。血清中出现前S1、前S2抗原是HBV活动性复制的标志 。前S2蛋白具有较S1蛋白更强的免疫原性 ， 含有前S2蛋白的HBsAg诱生的抗-HBs ， 其滴度明显高于不含前S2蛋白的HBsAg所诱生者 。前S2蛋白具有聚合人血清白蛋白受体（PHSAR）的功能 ， 能使HBV与聚合人血清蛋白结合 ， 以致免疫系统不易识别 ， 且可通过肝细胞膜上的PHSAR而吸附于肝细胞膜上 ， 从而侵入肝细胞 。（3）乙型肝炎核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗-HBc）：HBcAg主要存在于受染的肝细胞核内 ， 复制后被释放到胞浆中 ， 由胞浆中形成的HBsAg包裹 ， 装配成完整的病毒颗粒后释放入血 。血液中一般不能查到游离的HBcAg 。血中的Dane颗粒经去垢剂处理后可以查到其核心部分的HBcAg和DNA聚合酶 。抗-HBc在HBsAg出现后2～5周 ， 临床症状未出现即可由血内测到 。早期出现者主要是抗-HBcIgM ， 以19S五聚体IgM抗-HBc为主 ， 其滴度迅速上升并保持高滴度 ， 至HBsAg消失后 ， 抗-HBcIgM滴度即迅速降低 。抗-HBcIgM一般在血内维持6～8个月 ， 是近期感染的重要标志；但在慢性活动型肝炎患者血中亦可测到 ， 主要是7-8S单体IgM抗-HBc 。抗-HBcIgG出现较迟 ， 但可长期存在 。抗-HBc对HBV感染无保护作用 。血清中抗-HBcIgM阳性表明体内有HBV复制 ， 且有肝细胞损害；若抗-HBcIgG阳性且滴度高 ， 伴以抗-HBs阳性 ， 则为乙型肝炎恢复期；若抗-HBcIgG呈低滴度 ， 抗-HBcIgM阴性 ， 而抗-HBs阳性 ， 则是既往感染的标志 。HBV-DNA聚合酶存在于Dane颗粒核心内 ， 是一种依赖于DNA的DNA聚合酶 ， 其功能与修补及延伸双链DNA的短链有关 。患者血清中HBV-DNA聚合酶活性增高常伴有HBV增殖 。在急性乙肝的潜伏期内 ， 血清ALT升高之前 ， 血清DNA聚合酶活力即已升高 ， 因此 ， DNA聚合酶活力测定具有早期诊断意义 。急性肝炎患者在发病1个月后若HBV-DNA聚合酶活力仍持续升高 ， 是肝炎转为慢性的征兆 。（4）乙型肝炎e抗原（HBeAg）和e抗体（HBe）：HBeAg是以隐蔽形式存在HBV核心中的一种可溶性蛋白 ， 其编码基因相互重叠 ， 是HBcAg的亚成分 。在感染HBV后 ， HBeAg可与HBsAg同时或稍后出现于血中 ， 其消失则稍早于HBsAg 。HBsAg仅存在于HBsAg阳性者的血液中 ， 通常伴有肝内HBV-DNA的复制 ， 血中存在较多Dane颗粒和HBV-DNA聚合酶活性增高 ， 因此 ， HBeAg阳性是病毒活动性复制的重要指标 ， 传染性高 。急性肝炎患者若HBeAg持续阳性10周以上 ， 则易于转为持续感染 。抗-HBe在HBeAg消失后很短时间内即在血中出现 ， 其出现表示病毒复制已减少 ， 传染性降低 。但抗-HBe阳性者的血清中仍可查到少数Dane颗粒 ， 且在患者肝细胞核内可检出整合的HBV-DNA片断 。抗-HBe在临床恢复后尚可持续存在1～2年 。
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